超薄切片

超薄切片

超薄切片(Ultrathin sectioning)是指用于电子显微镜观察的极薄切片,其厚度通常在40~50纳米之间 。

取材的基本要求

动作迅速,组织从活体取下后应在最短时间内投入2.5% 戊二醛 固定液。

所取组织的体积要小,一般不超过1mm×1mm×1mm。也可将组织修成1mm×1mm×2mm大小长条形。

机械损伤要小,解剖器械应锋利,操作宜轻,避免牵拉、挫伤与挤压。

操作最好在低温(0℃~4℃)下进行,以降低酶的活性,防止 细胞 自溶。

取材部位要准确 。

取材过程

将取出的组织放在洁净的蜡版上,滴一滴预冷的固定液,用两片新的、锋利的刀片成“拉锯式”将组织切下并修小,然后用牙签或镊子将组织块移至盛有冷的固定液的小瓶中。如果组织带有较多的血液和组织液,应先用固定液洗几遍,然后再切成小块固定 。

制备过程

超薄切片的制作使用的是超薄切片机,以及玻璃刀或钻石刀作为切割工具。为了能够成功地制成 薄片 ,被包埋的标本的包埋剂必须具有足够的硬度,这通常通过 没药树 聚合来实现。具体的方法包括:首先使用 四氧化锇 和 戊二醛 固定样品,随后使用 丙酮 逐步去除水分,接着使用 ep 进行包埋。接下来,利用热膨胀或机械伸缩的方式进行切片,最后使用重金属如铀、铅等盐类进行染色。

参考资料

  1. 超薄切片技术 百度文库 2024-11-28
  2. 超薄切片技术与电镜下的样品观察 百测网 2024-11-28
  3. 获得高质量的超薄切片 徕卡显微系统 2024-11-28