自生固氮菌

在土壤中能够独立进行固氮的细菌

自生固氮菌是指在土壤中能够独立进行固氮的细菌。由于培养等处理容易,在实验室里可固定大量氮素,所以对固氮的研究多使用此种生物。自生固氮菌大多数是杆菌或短杆菌,单生对生皆有。经过两三天的培养,成对的菌体呈“∞”排列,并且外面有一层厚厚的荚膜。在自然界广泛分布于土壤和水中,与 蓝藻 同为固定游离氮类的生物,一般不适合在酸性环境中培养。该菌除能固氮外,还具有极高的呼吸活性,呼吸商(QO2)可高达2000。随着条件的不同,有的种类可形成 包囊 。

种类分类

褐色球形自生固氮菌( A. chrooco-ccum )(又称“圆褐固氮菌”)

褐色 自生固氮菌( A. vinelanii )

敏捷氮单胞菌( A. agilis )

印度拜耶林克氏菌( Beijerinckia indica )

固氮方式

总反应式 N2+6H^+nATP+6e——→2NH3+nADP+nPi

自生固氮菌的固氮方式和其它固氮生物大体相同,由固氮酶系统循序 催化 进行, atp 一定要与镁(Mg)结合而形成Mg-ATP 配位化合物 才能起作用。

固氧作用中电子的传递过程

氮酶 还原酶 与 重症肌无力 ATP结合后,被 铁氧还蛋白 或 黄素氧还蛋白 或Na2S2O4还原并与酶暂时地结合,以进行电子转移。氮酶还原酶每次转移一个e给氮酶。伴随着两个Mg-ATP的 水解 。在催化过程中,氮酶还原酶必需反复氧化还原,以保证有足够的电子转移给氨酶,还有氮分子。

固氮酶除能将分子氮还原为氨外,还能催化一些具有N—N、N=O、C≡N以及C≡C键化合物的还原,如将 乙炔 ( C2H2 )还原为 甲烷 ( CH4 )等。用乙 炔 还原法测定固氮酶活性,就是根据固氮酶作用底物的多样性。固氮酶还原C2H2形成 乙烯 ,能够用气相层析仪快速测定,简便而灵敏。这一固氮酶活性的间接测定法已被广泛应用。

许多化合物是固氮酶的 抑制剂 ,当其他废物存在时,都可与分子氮竞争电子。氢是 固氮作用 的专一性抑制剂,但不抑制其他底物的还原作用,也不抑制 atp 的 水解 。另一方面,氢也是固氮过程中的产物。固氮酶在还原氮的同时放氢,这对固氮作用是不利的,因为消耗了ATP和电子。有些固氮细菌具有氢酶催化氢分子为质子,H22H++2e,使放出的电子被再利用,从而节约了能源。

固氮酶对氧敏感,氮的还原过程是在无氧条件下进行的。自生固氮菌对固氮酶的防氧保护机制,能够在进行有氧生活的同时固氮。保持很强的呼吸活性,借以维持 细胞 内固氮酶周围的低氧浓度;另一方面,它的细胞中含有一种 Fe-S 蛋白,与固氮酶结合时增加后者的稳定性。此外,自生固氮菌在胞壁外被有荚膜或粘质,有阻碍氧向细胞内扩散的作用。

氨是 固氮作用 的产物,但在培养 固氮菌 时加 铵盐 ,则固氮作用受到抑制,这时固氮菌利用现成的化合态氮进行生长。氨不是抑制固氮酶本身的活性,而是阻碍固氮酶合成基因的表达。整个作用机制很复杂。固氮菌具备一套酶系统,能有效地将氨转化为氨基酸,进而同化为 蛋白质 。 氨基 酸的合成是通过谷氨 胺合成酶( GS )和 谷氨酸 合成酶( GOGAT )的偶联作用,同时有各种氨基转移酶参加。所以自生固氮菌在固氮过程中,不会在 细胞 中积累氨,也很少有氨分泌到细胞外面来。

生态分布

将不同地点的土样均匀地撒在无氮培养基平板上,分离并鉴定自生固氮菌。同时采用抑菌圈法和分光光度计测透光率的方法,检测6种常用的田间农药对自生固氮菌的生长影响;还运用 茚三酮 显色反应检测农药对自生固氮菌固氮效果的影响。结果表明,不同农药及其不同浓度对自生固氮菌生长及固氮量的影响有所不同。为添加 固氮菌 以提高农作物产量,监测固氮菌含量来评估作物产量,以及田间正确使用农药提供了理论依据。