肽核酸,一类以 多肽 骨架取代糖磷酸主链的 脱氧核糖核酸 类似物,是 丹麦 有机化学家 Ole Buchardt和生物化学家 Peter Nielsen 于20 世纪80 年代开始潜心研究的一种新的核酸序列特异性试剂。它是在第一代、第二代反义试剂的基础上,通过 计算机 设计构建并最终人工合成的第三代反义试剂,是一种全新的DNA类似物,即以中性的肽链 胺2- 氨基 乙基 甘氨酸 键取代了DNA中的 戊糖 磷酸二 键骨架,其余的与DNA相同,PNA可以通过Watson-Crick 碱基 配对的形式识别并结合DNA或 核糖核酸 序列,形成稳定的双螺旋结构。
基本定义
肽核酸(peptide nucleic acids,PNA),由于PNA不带负电荷,与 脱氧核糖核酸 和RNA之间不存在 静电 斥力,因而结合的稳定性和特异性都大为提高;不同于DNA或DNA、RNA间的杂交,PNA与DNA或RNA的杂交几乎不受杂交体系盐浓度影响,与DNA或RNA分子的杂交能力远优于DNA/DNA或DNA/RNA,表现在很高的杂交稳定性、优良的特异序列识别能力、不被核酸酶和蛋白酶水解。并可以与配基相连共转染进入 细胞 。这些都是其他 寡聚核苷酸 所不具备的优点。鉴于上述诸多 DNA分子 不具备的优点,近十年来,人们为其在许多高技术领域找到了用途。
结合方式
肽核酸与 脱氧核糖核酸 / 核糖核酸 主要有 4 种结合方式:
1 、标准的多聚嘌呤 PNA 入侵 双链DNA ;
2、PNA 双重双链入侵,形成稳定的 配位化合物 ,但只能发生在含有 修饰碱基 的 PNA 分子上;
3、传统的三链体结构,由富含 胞嘧啶 的多聚 PNA 与互补的多聚 嘌呤 DNA 靶标结合;
4、稳定的三链体入侵复合物,导致右侧被取代的DNA 单链形成D环结构。
主要特点
根据PNA的代谢稳定性,主要将其用于抑制基因表达的反义药物研究领域,国外几家制药及 生物技术 公司,ISIS、PE等公司均投入大量精力从事开发研究;根据其与 脱氧核糖核酸 优良的杂交稳定性,PNA又被广泛用于 DNA分子 识别和操纵。PNA可以广泛用于 病原体 、遗传病检测的分子杂交、原位杂交、突变分析、抗癌、抗病毒反义核酸研究和应用。尤其是PNA可以取代寡核 酸用于基因芯片的制备,将比普通基因芯片更稳定,特异性也更好,被认为是基因芯片的升级产品,相信在临床诊断芯片的开发方面。PNA也可用于定量PCR,可以用于实时检测PCR的扩增反应;也可将其做成PNA Beacon,用于实时监测细胞内的 核糖核酸 表达。随着PNA基础研究的不断深入和新技术的不断出现,PNA将显示出无比优越的性能和更为广阔的应用前景。