半定量RT-PCR(Semi-quantitative RT-PCR)是一种常用于估计 核糖核酸 水平的技术。它结合了逆 转录 (Reverse Transcription,将RNA转录为 脱氧核糖核酸 )和 聚合酶链式反应 (PCR),通过比较目标基因产物和内参基因产物的相对丰度来估计目标基因在不同样本中的表达水平。由于使用了内参基因作为标准,因此这种方法称为“半定量”。
半定量分析
在进行半定量RT-PCR时,首先利用 反转录酶 将RNA转录为相应的DNA,接着利用PCR对所得的DNA进行 扩增 。通过分析PCR产物在 琼脂糖 凝胶电泳 中的带状的相对强度来估计不同样品中 核糖核酸 的相对水平。因此,半定量RT-PCR提供了一种相对的、快速的方法来比较样品中RNA的相对量,但不能提供绝对的RNA数量。
应用
该技术在基因表达研究和其他分子生物学实验中得到了广泛应用。