结冷胶

一种微生物多糖

结冷胶(Gellan Gum),又称凯可胶、洁冷胶,是由伊乐藻假单胞菌(Pseudomonas elodea)所产生的微生物 多糖 。 主要成分有葡萄糖、 葡萄糖醛酸 和 鼠李糖 ,比例为2:1:1,四种单糖为重复结构单元所组成的线形 多聚糖 ,其中葡萄糖醛酸可被钾、钙、钠、镁中和成混合盐。

天然结冷胶(带有 乙酰 及 丙三醇 基团 )可形成柔软的弹性胶,黏着力强,与 黄原胶 和 槐豆胶 的性能相似,而脱乙酰[xiān]结冷胶则形成结实的 脆性 胶,类似于 琼脂 、 卡拉胶 的 凝胶 特性。

结冷胶干粉呈米黄色,无特殊的滋味和气味,约于150℃不经熔化而分解。不溶于非极性有机溶剂,溶于热水,水溶液呈中性。结冷胶的水溶液具有高黏性和热稳定性,结冷胶的主要作用是作为凝胶剂、 增稠剂 、悬浮剂或在食品中形成薄膜。结冷胶已经应用于 烘焙食品 、 乳制品 、果汁、牛乳饮料、糖衣、糖霜、 果酱 、肉制品和各种甜点的加工中。

简介

结冷胶(GellanGum)是美国Kelco公司20世纪80年代开发的一种微生物食用胶。它是由假单脑杆菌 伊乐藻属 (Pseudomonaseloden)在中性条件下,以 葡萄糖 为碳源, 硝酸铵 为氮源及一些 无机盐 所织成的 培养基 中,经有氧发酵而产生的 细胞 外 多糖 胶质,是一种新型的全透明的凝胶剂。

基本结构

结冷胶又称凯可胶,是一种 有机高分子化合物 线性多糖,田4个单糖分子组成的基本单元重复聚合而成.其基本单元是由1,3—和1,4—连接的2个葡萄糖 残基 ,1,3—连接的1个 葡萄糖醛酸 残基,和1,4—连接的1个 鼠李糖 残基组成。其 中葡萄 糖醛酸可被钾、钠、钙、镁中和成混合盐。并且天然结冷胶合有O— 酰基 ( 甘油 酰基和 乙酰 )。天然或称高酰基结冷胶可形成高弹性低硬度 凝胶 。乙酰化结冷胶通过碱处理除去O—酰基后生成低酰基结冷胶,再经过滤可得到纯化低酰基结冷胶,即商品结冷胶,其相对分子质量约为50万。

性状

结冷胶干粉呈米黄色,无特殊的滋味和气味,约于150℃不经熔化而分解。耐热、耐酸性能良好,对酶的稳定性亦高。不溶于非极性有机溶剂,也不溶于冷水,但略加搅拌即分散于水中,加热即溶解成透明的溶液,冷却后,形成透明且坚实的凝胶。溶于热的去离子水或整合剂存在的低 离子强度 溶液,水溶液呈中性。

结冷胶在 阳离子 存在时,在加热后冷却时生成坚硬 脆性 凝胶 。其硬度与结冷胶浓度成正比,并且在较低的二价阳离子浓度时产生最大凝胶硬度。结冷胶用量小,通常只为琼脂和卡拉胶用量的1/3~1/2,一般用量0.05%即可形成凝胶(通常用量为0.1%~0.3%)。所形成的凝胶富含汁水,具有良好的风味释放性,有入口即化的口感。结冷胶凝胶的凝固温度在30-45℃范围内,而凝胶的熔化温度既可低于又可高于100℃,这取决于阳离子类型和浓度等条件。添加黄原胶—槐豆胶到结冷胶中,可使其凝胶硬度降低而弹性增强。

毒性

LD50大鼠口服为5000g/kg体重。 ADI 无需规定。

用途

由于结冷胶优越的 凝胶 性能,目前已逐步取代 琼脂 、 卡拉胶 的使用。结冷胶广泛的应用在食品中,如 布丁 , 果冻 , 白糖 ,饮料,奶制品, 果酱 制品,面包填料,表面光滑剂,糖果,糖衣,调味料等。也用在非食品产业中,如微生物 培养基 ,药物的缓慢释放,牙膏等。

结冷胶可以增强面制品面条的硬度、弹性、粘度,业有改善口感、抑制热水溶胀,减少断面和减轻汤汁浑浊等作用,加入到制作饼干的面团中,也可以起到改良饼干的层次,使饼干具有良好的疏松度的作用;结冷胶作为 稳定剂 应用于 冰淇淋 可提高保型性;用于 蛋糕 、 奶酪饼 中,具有保湿、保鲜和保形的效果;结冷胶应用于糖果,可以给产品提供优越的结构和质地,并缩短淀粉软糖 胶体 形成的时间;也可用于替代 果胶 制备 果酱 和 果冻 ,也能用于糕点和 水果馅饼 填料中;在肉制品和蔬菜类制品的加工过程中,添加结冷胶会使其具有清爽的品味,起到弥补产品口味不足的良好作用。结冷胶可与其他水溶胶一起使用,用于 凝胶 宠物食品;可与 蔗糖 、 柠檬酸钠 、缓慢溶解性酸( 脂肪酸 、 己二酸 )等混合成 海产干货 ,加入沸水中,制成具有极高透明度的热水甜点凝胶,具有入口后快速破碎,风味释放好的特点;可替代果胶制作果酱.也可与淀粉结合或部分取代淀粉,用糕点和水果馅饼填料。

根据《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760-2011)规定本品可在各类食品中按正常生产需要适量使用。

质量标准

低 酰基 结冷胶

生产流程

尝试通过发酵的途径来生产有实用价值的微生物 多糖 已有很长的历史,这当中被广泛研究的多糖包括:用 Leuconostoc  mesenteroides生产的 葡聚糖 ,用 假单胞菌属   sp.生产的细菌海藻 酸盐 , 用Xanthamonas compestris生产的 黄原胶   , 用 Streptococcus  faecalis生产的 热凝胶 ,用Aureobasidium pullulans生产的普鲁兰糖,以及用Strptococcus equii 生产的 透明质酸 和 根瘤菌 生产的 琥珀 聚糖 等。尽管能获得商业化生产的 多糖 只占在所研究过的多糖中极少部份,但这一少部份多糖因其极好的性能而能在工业上被广泛使用。也正由于 黄原胶 等 多糖 的开发取得了巨大的成功,鼓舞人们期望找到更多的有商业前景的微生物多糖。

1) 结冷胶生产菌种

为了寻找理想的食品胶,Kelco公司在世界各地采集土壤或植物样本对30,000多株菌种进行了筛选,结冷胶的产生菌正是在这种不懈努力下获得的,原来称为 假单胞菌属   elodea ,后来基于r- 核糖核酸 特征及含有 鞘氨醇 糖脂 被进一步确认为Sphingomonas paucimobilis,这是种带有黄色色素、Gˉ的好氧杆状菌。从 生物技术 的角度来看,Sphingomonas这一属中的菌株的共同特征是能分泌出如结冷胶、沃仑胶、 鼠李 胶这样的一类 多糖 。

这些菌株能从多种环境中分离得到,不过Sphingomonas paucimobilis中的多数菌株是从临床样本或医院周边环境中分离到的。工业上最早采用的结冷胶生产菌株为 假单胞菌属   伊乐藻属 ,它是从一种水百合上分离而得。

2) 结冷胶的 生物合成 途径

微生物 胞外多糖 的生物合成可以分为同型多糖的合成与异型多糖的合成,结冷胶的合成属于后者。异型多糖的合成体系包含5个因子,即 糖基 核 酸、 酰基 供体、脂 中间体 、酶系统及糖基受体。Ligio等提出了 Pseudomonas  eLAdea合成结冷胶重复四糖单元的可能途径。作为活性 前体 提供的糖基 核苷酸 被认为是 UDP- 葡萄糖 、TDP- 鼠李糖 和UDP- 葡萄糖醛酸 ,它们共同成为合成重复单位的 单体 供体。涉及前体合成的酶有磷酸葡萄糖 异构酶 (PG1)、磷酸葡萄糖 变位 酶(PGM)、UDP-葡萄糖焦 磷酸化酶 (UGP)、TDP-葡萄糖焦磷酸化酶(TGP)、UDP- 葡萄糖脱氢酶 (UGD)和TDP-鼠李糖合成酶(TRS)。 假单胞菌属  elodea对葡萄糖的代谢主要经由 糖酵解 途径和 戊糖磷酸途径 。

3) 结冷胶的生产技术

它是在含有碳源、有机和 无机 氮源、 磷酸盐 适量 微量元素 的介质中,通过通风发酵进行生产。发酵在消毒的条件下严格控制通气量、搅拌、温度和pH,发酵完成后,用物理、 化学 方法分离 菌丝 蛋白得到结冷胶产品。

成分解析

热稳定性

结冷胶具有良好的热稳定性,它能承受多个周期的热处理。

温度滞后性

结冷胶具有显著的温度滞后性,即胶凝温度远低于 凝胶 的融化温度。通常,胶凝温度于20一50℃之间,而融化温度则介于65—120℃。胶凝温度和融化温度的大小主要取决于凝胶的形成条件,如 阳离子 的类型和浓度等。结冷胶的温度滞后性对食品工业具有重要的实用意义。例如,有些制品要求在加工过程中凝胶后再融化。而其他制品要求在 热处理 过程中凝胶结构保持稳定。

盐对结冷胶凝胶的影响

纯的结冷胶是一种复合盐,不溶于冷水,但在搅拌下可直接分散于去离子水中,提高水中阳离子的浓度,如硬度中等的水(相当于含CaCO3,180mg/kg),有助于其在水中的分散。但Ca2+、Mg2+、Na+、K+等离子(如 硬水 )能阻止已分散的结冷胶加热水化, 阳离子 的浓度越高,则即使加热至沸也无法使之水化。

在已经分散的水中,加入少量整合剂(如 柠檬酸钠 、 六偏磷酸钠 ),可使分散的结冷胶即使在硬度很高的水中也能水化,只要所加熬合剂的量与Ca2+等的含量适当,甚至可溶于冷水。热的均匀水化的胶溶液冷却后可直接成为 凝胶 ,但需加入阳离子后方能凝结,并随着阳离子浓度的提高可使凝胶的硬度和模量提高到最大值,但浓度超过一定限度,又会使凝胶体的硬度和模量下降,而且一价阳离子与两价阳离子的最适浓度并不一样。

酸、碱对结冷胶凝胶的影响

绝大多数食品的pH介于4.0一8.0之间,结冷胶凝胶在这个PH范围内,其凝胶强度几乎不随pH变化而变化,而结冷胶应用于食品中时,可以不考虑pH的影响。 美国 一些专家研究指出:二价 阳离子 所形成的结冷胶凝胶。其强度在pH小于3.5或大于8.5时, 凝胶 强度迅速下降;一价阳离子所形成的凝胶,其强度在pH介于3.5—1L.5之间有微小的波动。但是,在相同胶浓度的条件下所形成的凝胶,二价阳离子的凝胶强度比一价阳离子的凝胶强度要大得多。

酶对结冷胶藏胶的影响

美国一些科技人员曾将各种酶(包括 果胶酶 、α— 淀粉酶 、β—淀粉酶、纤维素酶、褐藻酸酶、 木瓜蛋白酶 、脂肪酶等)添加于结冷胶溶液中,结果发现,任何一种酶对结冷胶溶液的粘度以及凝胶的强度均没有影响,由于具备这种性质,结冷胶可以替代 琼脂 作为微生物 培养基 的 增稠剂 。

与其他胶类的配伍性

在复配时, 槐豆胶 、 瓜尔胶 、CMC、 黄原胶 等非 凝胶 性水溶胶,对结冷胶凝胶体的组织特性无明显影响。但如加入明胶、黄原胶与槐豆胶的 混合物 、淀粉等凝胶性水溶胶时,可使组织结构发生明显变化。

前景展望

结冷胶作为微生物代谢胶,生产周期短,不受气候和地理环境条件的限制,可以在人工控制条件下利用各种废渣、废液进行生产,再加上其安全无毒, 理化 性质独特等优良特性,在食品工业中有着广泛的应用前景。

虽然结冷胶生产取得了许多成果,但还存在一些问题,如产量低;用于通气搅拌的能源高; 提纯 用的有机 溶剂 耗量大;有机溶剂的回收较困难等。因而如果能利用 基因工程 手段将产胶基因转移到嫌气性微生物中正常表达,从而在无氧或微氧条件下生产则可 降低成本 。总之,通过基因工程手段筛选优质 多糖 产生菌,并利用现代 生物技术 构建具有多种优异性能的基因工程菌与 细胞工程 菌来提高结冷胶产率与质量,将是未来结冷胶生产与研究的发展方向。

参考资料